1. Μέθοδος ταυτοποίησης στρώματος λεπτού στρώματος
Λαμβάνετε 0,5 g σκόνης από φαρμακευτικά βότανα επιμεμίου ή κατάλληλη ποσότητα εκχυλίσματος, προσθέστε 10 ml αιθανόλης, βυθίζετε για 30 λεπτά, διηθήστε και εξατμίστε το διήθημα. Προσθέστε 1 ml αιθανόλης για να διαλύσετε το υπόλειμμα, το οποίο είναι το διάλυμα δοκιμής. Η ουσία αναφοράς icariin ζυγίστηκε, διαλύθηκε σε μεθανόλη και αραιώθηκε στα 0.1 mg / ml, το οποίο ήταν το διάλυμα αναφοράς. Ρυθμίστε με σιφώνιο 10 μl καθενός από το διάλυμα ελέγχου και το διάλυμα αναφοράς, αντίστοιχα, σε πλάκα λεπτού στρώματος πυριτικής πηκτής H της ίδιας καρβοξυμεθυλοκυτταρίνης νατρίου ως συνδετικό μέσο, με οξικό αιθυλεστέρα-βουτανόνη-μυρμηκικό οξύ-νερό (10: 1: 1 : 1) ως παράγοντας ανάπτυξης, ξετυλίγεται, αφαιρείται, ξηραίνεται στον αέρα και τοποθετείται σε λυχνία UV (365 nm) για εξέταση. Στο χρωματογράφημα του δείγματος δοκιμής, το ίδιο σκούρο κόκκινο σημείο εμφανίζεται στη θέση που αντιστοιχεί στο χρωματογράφημα της ουσίας αναφοράς. ψεκάζεται με τριχλωρίωση Το διάλυμα δοκιμής αλουμινίου εφαρμόστηκε εκ νέου με λάμπα υπεριώδους ακτινοβολίας (365 nm) για να αποκαλυφθεί το ίδιο πορτοκαλί-κόκκινο σημείο φθορισμού.
2. Φασματοφωτομετρικός προσδιορισμός των συνολικών φλαβονοειδών στο Epimedium και στα εκχυλίσματα του
Το προϊόν αναφοράς icariin ζυγίστηκε με ακρίβεια και μορφοποιήθηκε σε πρότυπο διάλυμα 10 μg / ml με μεθανόλη. Ζυγίστε με ακρίβεια την ποσότητα της σκόνης αυτού του προϊόντος (ισοδύναμη με περίπου 1 mg icariin), κάντε υπερήχους με 25 ml μεθανόλης για 30 λεπτά, αραιώστε σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml, διηθήστε με μικροπορώδη μεμβράνη 0,45 μm, δηλαδή δοκιμάστε το διάλυμα του προϊόντος. Το διάλυμα δοκιμής και το διάλυμα αναφοράς ελήφθησαν χωριστά και η απορρόφηση μετρήθηκε σε μήκος κύματος 270 nm με το αντιδραστήριο ως τυφλό και ο υπολογισμός αποκτήθηκε.
3. Προσδιορισμός του icariin στο Epimedium και το εκχύλισμα του με HPLC
Χρωματογραφικές συνθήκες και έλεγχος καταλληλότητας συστήματος: στήλη ODS2 5u C18 (4 mm χ 150 mm). κινητή φάση: ακετονιτρίλιο-νερό (30:70). μήκος κύματος ανίχνευσης: 270 nm. ρυθμός ροής: 0,8 ml / min. Ο αριθμός των θεωρητικών πλακών δεν είναι μικρότερος από 1500 με βάση το icariin.
Παρασκευή του διαλύματος αναφοράς: Το προϊόν αναφοράς icariin ζυγίστηκε με ακρίβεια και παρασκευάστηκε ένα διάλυμα 0,1 mg / ml με μεθανόλη.
Προετοιμασία του διαλύματος δοκιμής: ζυγίστε με ακρίβεια την κατάλληλη ποσότητα σκόνης αυτού του προϊόντος (ισοδύναμη με περίπου 1 mg icariin), κάντε υπερήχους με μεθανόλη 25 ml για 30 λεπτά, αραιώστε σε ογκομετρική φιάλη των 50 ml, χρησιμοποιήστε μικροπορώδη φίλτρο 0,45 μm.
Μέθοδος ανάλυσης: 10 μΙ κάθε διαλύματος δείγματος και διαλύματος αναφοράς εγχύθηκαν στο όργανο HPLC και η περιοχή υπολογίστηκε με εξωτερική πρότυπη μέθοδο.